CULTIVO, DETECCIÓN E IDENTIFICACIÓN DE MICOBACTERIAS

Laboratorio: Referencia microbiana

Descripción de la prueba: Cultivo, detección e identificación de micobacterias, incluyendo el complejo Mycobacterium tuberculosis (MTBC)

¿Se requiere la aprobación del pedido?

• Sí (excepto los aislados de cumplimiento de MTBC)
• Envío de muestras clínicas (solo solicitud de VDH)
• Genotipado MTBC (solo solicitud de VDH)
• Identificación de micobacterias no tuberculosas (solo solicitud de VDH)
• No es necesario para el envío de aislados de cumplimiento de MTBC

Tipo de espécimen:

• Aislamiento puro del complejo Mycobacterium tuberculosis ; Aislado puro de micobacterias no tuberculosas
• Muestras clínicas (absceso/exudado, sangre, médula ósea, líquido corporal, líquido cerobrocefaliforme (LCR), lavado gástrico, respiratorio (respiratorio inferior y esputo), heces, tejido/biopsia, orina)

Contenedor de recolección:

• Aislados: Inclinados (p.ej. LJ slant), caldo (p. ej. 7H9 caldo), o medios de placa (p. ej. 7H10 placa)
• Sangre: aislador, sulfonato de polianetal de sodio (SPS) o tubo que contiene heparina
• Médula ósea: tubo de polianetal sulfonato de sodio (SPS) o heparina
• Todos los demás especímenes: recipiente estéril a prueba de fugas

Volumen óptimo:

• Sangre y médula ósea: 10 mL
• Líquido corporal: 15 mL
• CSF: 10 mL
• Lavado gástrico: 15 mL
• Vías respiratorias inferiores (BAL, cepillo o lavado de Bronch, aspirado endotraqueal): 5 mL
• Esputo (expectorado o inducido): 5 mL
• Heces: 1 gramo
• Tejido: 1 gramo
• Orina: 40 mL

Pautas de cobro:

• Se proporcionan kits de recolección a VDH para muestras de esputo. Primera mañana, se observó la recolección preferida para el esputo.
• Lavado gástrico: El Departamento de Salud o el Control de TB deben consultar antes de enviar la muestra. Si las muestras no pueden procesarse dentro de las 4 horas posteriores a la recolección, se deben agregar 100 mg de carbonato de sodio al recipiente dentro de una hora después de la recolección y mezclar para neutralizar la acidez de la muestra.

Los remitentes aprobados por DCLS pueden solicitar kits de recolección en DCLS_SSSKits@dgs.virginia.gov.

Contenedor de almacenamiento: Recipiente estéril y a prueba de fugas (excepto sangre y médula ósea)

Instrucciones de almacenamiento:

• Almacene las vías respiratorias inferiores (incluido el esputo), los abscesos/exudados, los fluidos corporales, los tejidos, las heces y la orina a una temperatura de 2a8°C
• Las muestras de tejido/biopsia deben almacenarse en solución salina estéril no bacteriostática de 23 mL
• Almacene muestras de sangre, médula ósea, líquido cefalorraquídeo y lavado gástrico a 15-25°C
• Las muestras clínicas deben enviarse con un retraso mínimo, pero deben recibirse dentro de los 7 días posteriores a la recolección
• Almacenar los aislados a una temperatura de 2-30°C

Instrucciones de transporte:

• Transporte de las vías respiratorias inferiores (incluido el esputo), absceso/exudado, fluidos corporales, tejidos, heces, orina a 2-8°C (preferido); 2-30°C es aceptable
• Transporte de sangre, médula ósea, líquido cefalorraquídeo, muestras de lavado gástrico a 15-25°C
• Las muestras clínicas deben enviarse con un retraso mínimo, pero deben recibirse dentro de los 7 días posteriores a la recolección
• Transporte aislado: 2-30°C

Metodología de la prueba:

• PCR para identificación del complejo Mybacterium tuberculosis y del complejo Mycobacterium avium (esputo y aislado)
• Identificación MALDI-TOF
• MGIT 960 Pruebas de susceptibilidad a las antimicobacterias (AST), solo MTBC (1.0 ug/mL de rifampicina, 0.1 ug/mL de isoniazida, 0.4 ug/mL de isoniazida, 5.0 ug/mL de etambutal, 100 ug/mL de pirazinamida, 0.25 ug/mL de Moxifloxacina)
• Xpert MTB/RIF
• Cultivo y frotis de fluorocromo (no se realiza frotis en muestras de sangre y médula ósea)

Información adicional: TBD

Causas de rechazo:

• Muestras sin nombre/identificador o etiquetas de muestra y formularios de solicitud de prueba que no coinciden
• Condiciones de recogida o transporte incorrectas
• Contenedores de recolección rotos o con fugas.
• Las recolecciones de orina de veinticuatro horas no son aptas para el cultivo y serán rechazadas
• Las muestras de hisopo no se recomiendan para la recolección de muestras y serán rechazadas
• Espécimen visiblemente contaminado con sustancias extrañas
• Sangre que no se suministra en un aislador, SPS o tubo de heparina
• Médula ósea no presentada en SPS o tubo de heparina
• Espécimen demasiado viejo; más de 7 días desde la fecha de recolección
• Muestras de lavado gástrico no presentadas con carbonato de sodio
• Aislados de MTBC duplicados enviados para cumplimiento
• Aislados en medios que caducaron antes de la inoculación
• Muestras pulmonares clínicas recogidas con menos de 8 horas de diferencia
• Muestras extrapulmonares clínicas recogidas el mismo día de la misma fuente
• Espécimen recibido fuera del rango de temperatura apropiado